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Immobilized IdeS,Microspin
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QIP-101-A
1支
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QIP-101-B
5支
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QIP-101-C
10支
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产品概述

背景:

       Rhinogen® IdeS protease是利用E. coli表达系统重组表达生产并经过分子改造得到的重组IdeS蛋白酶,分子量大小约为36kDa。其仅在铰链区下方的一个特定位点裂解IgG以产生F(ab')2和Fc片段。且在生理条件下切割IgG,从而保持免疫原性。在pH 6.0~8.0范围的常用缓冲液中,IdeS蛋白酶可有效切割多种抗体。经过改造后的IdeS蛋白酶具有更高的酶活和更广的底物特异性,除可酶切人IgG1~4(切割位点如下表1)、猴、羊、兔IgG外,还对小鼠IgG2a、IgG3具有特异性切割活性。

       Rhinogen® Immobilized IdeS,Microspin是一种将Rhinogen® IdeS protease共价偶联到琼脂糖珠的树脂,可在特定位点裂解IgG以产生F(ab')2和Fc片段。消化完成后的溶液内,可得到F(ab')2和Fc片段,而不含IdeS酶。


包装规格:

       Rhinogen® Immobilized IdeS,Microspin包装规格如下:
                  目录号
        规格
               QIP-101-A
         1支
               QIP-101-B
         5
               QIP-101-C
        10支

       一支Immobilized IdeS,Microspin可用于消化0.5mg IgG。
       产品储存于20%乙醇中,不添加防腐剂。

储存条件:

       采用冰袋运输,Immobilized IdeS,Microspin产品储存于20%乙醇中,收到产品后请立即将其置于2-8℃保存。避免冻存!

产品特点:

       Rhinogen® Immobilized IdeS,Microspin具有如下特性:

       1. 使用方便:消化完成后,通过离心即可分离得到消化产物;

       2. 回收率高:F(ab')2回收率>85%以上;

       3. 稳定性高:每批产品都经过严格的质量控制,以实现产品批间稳定性。 

应用:

       重组抗体药物的结构表征分析。

操作说明:

       1. Rhinogen® Immobolized IdeS,Microspin能有效地用于酶切人类、人源化、嵌合、羊、兔和猴的IgG,并对小鼠IgG2a和IgG3也具有中等活性。同时也适用于许多Fc-融合蛋白以及抗体药物缀合物(antibody drug conjugates,ADCs)的酶切;不适用于小鼠IgG1/IgG2b、大鼠、猪、牛或山羊IgG。此外,它不能切割非IgG同种型,包括IgA、IgM、IgD和IgE;
       2. 对于小鼠IgG2a和小鼠IgG3的切割,建议适度提高孵育温度(酶切温度越接近37℃,则酶活越高)及孵育时间(2小时至过夜);
       3. 理想的IgG浓度应在0.5-20mg/ml的范围内;
       4. 通过SDS-PAGE很容易确定IgG的切割;
       5. 将消化产物与protein A磁珠孵育30~60分钟后,可以获得纯化的F(ab’)2片段;另瑞安生物可提供产品 Rhinogen® Immobolized IdeS Cut-Pure Kit,Microspin(货号:QIP-102),内包含Immobilized IdeS,Microspin及Protein A纯化柱;
       6. 最适的酶切反应缓冲液pH为6.0~8.0,在低于pH5.0体系中,IdeS 固定化酶会不可逆的失活,在高于pH8.0体系中需要适当延长/优化反应条件;
       7. 本产品仅供研究使用,不适用于人或动物的诊断及治疗用途。


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