背景：

       来源于Streptococcus Pneumoniae（或Enterococcus Faecalis）的O-糖苷酶（O-Glycosidase，EC 3.2.1.97）是一类重要的糖基化研究的工具酶。Rhinogen^®  O-Glycosidase是将来源于Enterococcus Faecalis的O-Glycosidase基因重组并表达于大肠杆菌BL21中的重组酶，能够将糖蛋白中Ser或Thr残基的羟基连接的Core 1（Gal-β(1-3)-GalNAc-）及Core 3（GlcNAc-β(1-3)-GalNAc-）O-连双糖释放下来，如图1。该酶对α-GalNAc结合是特异性的，但对于Ser或Thr残基没有明显的偏好，同时糖蛋白的变性与否也不显着影响O-去糖基化的效率。核心结构的任何修饰都可以阻断O-Glycosidase的作用，最常见的修饰是核心结构的单、二或三唾液酸化。除此以外，核心结构还可能被岩藻糖，N-乙酰葡糖胺或N-乙酰半乳糖胺残基进一步取代修饰，核心结构以外的单糖必须通过一系列外切糖苷酶依次切割，直到仅保留Core 1或Core 3二糖核心。然后O-Glycosidase才能够完整的从Ser或Thr残基上释放二糖核心，如图2。通常O-Glycosidase的使用都需要配合唾液酸酶。

 图1 Rhinogen^® O-Glycosidase作用O-连二糖核心的类型

图2  复杂O-聚糖结构的糖链释放

产品包装：

       Rhinogen^® O-Glycosidase包装规格如下：

储存体系：

       QPF-004储存在缓冲液中，以液体的形式提供。缓冲液的组成为：50 mM NaCl，20 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 7.5。

配套试剂：

       Rhinogen^® O-Glycosidase 配套提供的试剂如下：

试剂	成分
10×Denaturing缓冲液	5%SDS, 0.4M DTT
10×Glyco缓冲液2	0.5M Sodium Phosphate(pH7.5 at 25°C)
10%NP-40溶液	10%NP-40

产品来源：

       Rhinogen^® O-Glycosidase是一种将来源于Enterococcus Faecalis的O-Glycosidase基因重组并表达于大肠杆菌BL21中的重组酶，分子量大小约为147kDa。

产品质量：

       SDS-PAGE分析，纯度≥95%；没有检测到污染的外切糖苷酶、糖苷内切酶及蛋白酶活性。 

产品特性：

       最适反应pH为7.5；热失活条件：65°C处理10 min。 

酶活定义：

       1个酶活力单位定义：在100 μl反应体系中，37°C，pH7.5条件下，1小时内从5mg唾液酸酶消化后的非变性fetuin 上催化释放0.68nmol O-连二糖所需要的酶量。

储存条件：

       -20℃条件下，避免反复冻融。 

应   用：

       1.O-聚糖结构分析；

       2.糖蛋白生物合成分析；

       3.涉及O-聚糖的病理生理学研究；

       4.治疗性重组蛋白的表征及质量控制；

       5.癌症研究和异常O-糖基化的鉴定及体外诊断。