背景：  

       在生物制品的制备/生产过程中，去除DNA残留是极为重要的。在过去几年里，重组蛋白类生物药物的发展突飞猛进，并且在未来依然前景广阔。在微生物系统中，这些重组蛋白一般都是通过微生物的发酵，并且通过裂解微生物细胞而释放出来。然而，在释放出目标产物的同时，细胞裂解物会同时产生一些杂产物，比如宿主细胞蛋白、核酸（DNA以及RNA）、细胞内毒素以及一些其他宿主细胞杂质。重组蛋白药物、病毒疫苗等生物制品中的DNA残留可能会给患者体内带入激活的致癌基因，或者作为潜在的感染病毒DNA致使患者被感染。因此，DNA残留量是重组蛋白药物的一个重要的评价标准。世界上许多权威机构都对重组蛋白类药物中的宿主DNA残留量做出了严格的规定，对于每支疫苗中的DNA残留量，WHO规定不可以超过l0ng，美国FDA规定不可以超过10pg，我国规定为100pg以下。

概述：

       Nuclecut^TM全能核酸酶（SuperNuclease）是一种核酸内切酶，可将核酸降解成2~5个碱基的5'-单磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式（双链，单链，线状，环状）的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性，因此被称为“全能核酸酶”。全能核酸酶可以非特异性裂解单链以及双链的DNA和RNA，并切割出一个3'-OH和5'-磷酸基（如图1），主要用于重组蛋白、病毒疫苗、细胞和基因治疗用病毒载体、溶瘤病毒及其它生物制品中DNA/RNA去除。该酶在0~42℃的均有活性，最适温度为37℃。有效的pH范围为6.0-10.0，最适pH为8.0。发挥活性需要Mg²⁺存在，1-2mM为最佳。在去污剂、SDS、尿素等存在下仍然保持一定活性。

图1. 全能核酸酶的作用位点

产品包装：

       Nuclecut^TM GMP级全能核酸酶（SuperNuclease-GMP）包装规格如下：

       产品储存于20mM Tris-HCI，pH8.0，2mM MgCl₂，20mMNaCl和50%（v/v）甘油中，不添加防腐剂。

产品来源：

       Nuclecut^TM GMP级全能核酸酶序列来源于Serratiamarcescens，重组表达于E. coli，单体理论分子量约27.5KD，C端带6×His标签。

产品特性：

       全能核酸酶可非特异性降解所有形式的DNA和RNA（单链的、双链的、线性的和环化的），将核酸完全消化为长度为3至5个碱基的5'-单磷酸末端寡核苷酸。

       Nuclecut^TM GMP级全能核酸酶采用非动物源性原料， 不添加抗生素，符合GMP生产标准，满足法规要求。适用于重组蛋白、病毒疫苗、细胞和基因治疗用病毒载体、溶瘤病毒及其它生物制品中DNA/RNA去除。

产品质量：

       1. 高活性：≥1.1×10⁶U/mg 蛋白、≥250U/μl；

       2. 高纯度：通过SDS-PAGE检测，纯度≥95%；通过 SEC-HPLC分析确定，纯度 ≥99 %；

       3. 无蛋白酶活性：偶氮酪蛋白法分析无蛋白酶活性；

       4. 内毒素：由重组C因子法确定每1000 U核酸酶内毒素含量< 0.01 EU；

       5. 微生物检测：< 10 CFU/1×10⁶U。

储存条件：

       采用干冰运输，收到产品后请立即将其置于-20℃保存。

应用：

       1. 可从重组蛋白及其它生物制品中去除DNA/RNA

       2. 适用于病毒疫苗、细胞和基因治疗用病毒载体及溶瘤病毒的纯化

       3. 降低由核酸引起的粘度；

       4. 在二维凝胶电泳和色谱中制备样品

       5. 防止细胞结块，尤其是冷冻细胞

       6. 降低哺乳动物细胞提取物的粘度

       7. 降低大肠杆菌细胞裂解液的粘度以增强过滤性

       8. 从包涵体中纯化蛋白